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biosb BSB 3666說明書

 更新時間:2022-04-06 點擊量:875


biosb BSB 3666說明書

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TintoFast Cytokeratin 5 & 6 Antibody Immunohistochemistry on a Frozen Acetone-Fixed Melanoma Tissue

有可能的使用用于莫氏體外診斷

總結(jié)與說明

細胞角蛋白 5 (58 kDa) 是一種高分子量、基本類型的細胞角蛋白,在復(fù)層上皮細胞以及移行上皮細胞、復(fù)雜上皮細胞、間皮細胞和間皮瘤的基底、中間和表層細胞層中表達。細胞角蛋白 6 (56 kD) 也是一種高分子量、堿性類型的細胞角蛋白,由增殖的鱗狀上皮表達,通常與細胞角蛋白 16 配對。

TintoFast 細胞角蛋白 5 和 6 在幾乎 100% 的惡性間皮瘤中呈陽性,在肺腺癌中很少見。TintoFast Cytokeratin 5 和 6 在未分化的大細胞癌和鱗狀細胞癌中呈陽性。不到 10% 的乳腺癌、結(jié)腸癌和前列腺癌對該標(biāo)志物呈陽性染色。CK 5 和 6 也已成功用作前列腺中的肌上皮細胞標(biāo)記物來確定惡性腫瘤。


抗體類型小鼠單克隆克隆D5/16B4

同型IgG1反應(yīng)性石蠟,冷凍

本土化細胞質(zhì)控制SCC/密件抄送

介紹Anti-CK 5 & 6 是一種小鼠單克隆抗體混合物,來源于細胞培養(yǎng)上清液,經(jīng)過濃縮、透析、過濾滅菌和稀釋在 pH 7.5 的緩沖液中,其中含有 BSA 和疊氮化納作為防腐劑。

可用性
目錄號抗體類型稀釋數(shù)量/數(shù)量
BSB 3666TintoFast 預(yù)稀釋可以使用3.0 毫升
BSB 3667TintoFast 預(yù)稀釋可以使用7.0 毫升
BSB 3668TintoFast 預(yù)稀釋可以使用15.0 毫升


Mohs IHC 程序

莫氏冷凍組織的標(biāo)本制備

  1. 將標(biāo)本嵌入 OCT 中的低溫恒溫器內(nèi)。

  2. 在 4-5 µm 處切割切片并安裝在帶正電的載玻片上,例如 Bio SB Hydrophilic Plus 載玻片 (BSB 7028) 或 TintoDetector 蓋間隙載玻片 (BSB 7006) 的下三分之一處。

  3. 在室溫下風(fēng)干載玻片 2 分鐘,然后在培養(yǎng)箱或干浴中在 60°C 下孵育載玻片 3 分鐘。

  4. 在室溫下用 100% 丙酮或 10% NBF 固定 2 分鐘。如果使用 Bio SB Mohs ImmunoDigestor,使用 10% NBF 10% 會產(chǎn)生更好的形態(tài)。

  5. 對于固定在丙酮中的載玻片,讓它風(fēng)干。對于 NBF 中的幻燈片,用蒸餾水沖洗并風(fēng)干。

莫氏冷凍組織的預(yù)處理

  1. 將載玻片轉(zhuǎn)移到 ImmunoDNA Washer、TBST 或 PBST 緩沖液中。

  2. 使用 Mohs ImmunoDigestor 進行 PIER、蛋白水解消化 1 分鐘。在室溫下。

  3. 用 ImmunoDNA Washer、TBST 或 PBST 緩沖液沖洗。

IHC 檢測程序

  1. PIER 后,將載玻片轉(zhuǎn)移至 ImmunoDNA 清洗機,靜置 1-2 分鐘。

  2. 對于手動染色,在環(huán)境溫度下進行抗體孵育。對于自動染色方法,請根據(jù)儀器制造商的說明進行抗體孵育。

  3. 用 ImmunoDNA 洗滌器或去離子水清洗載玻片。

  4. 繼續(xù) IHC 檢測協(xié)議。用 ImmunoDNA 洗滌液在每個步驟之間清洗載玻片。

縮寫 Mohs PolyDetector DAB HRP Brown of HRP Green 免疫組化方案

  1. 用過氧化物酶阻滯劑孵育載玻片 30 秒

  2. 用緩沖液(TBST 或 PBST)清洗

  3. 與一抗孵育 4 分鐘

  4. 用緩沖液(TBST 或 PBST)清洗

  5. 用 HRP 標(biāo)簽孵育 3 分鐘

  6. 用緩沖液(TBST 或 PBST)清洗

  7. 準備

    • DAB Brown(在 1ml DAB 緩沖液中加入 1 滴 DAB Chromogen;充分混合)

    • 或 HRP Green(在 1 ml HRP Green Buffer 中加入 1 滴 HRP Green Chromogen;充分混合)

  8. 用 DAB 或 HRP Green 孵育 2 分鐘

  9. 用緩沖液(TBST 或 PBST)清洗

  10. 用蘇木精或核固紅復(fù)染 30 秒

  11. 用緩沖液(TBST 或 PBST)清洗

  12. 使用 AquaMounter 安裝或使用 Fast ChromoProtector 使組織脫水,然后使用 PermaMounter 安裝

Mohs PolyDetector HRP Green 或 DAB 協(xié)議
過氧化物酶阻滯劑30秒
一抗4分鐘。
第一步檢測(HRP 標(biāo)簽)3 分鐘。
底物色原1-2 分鐘。
復(fù)染/蓋玻片變化

此協(xié)議也可用于使用檸檬酸鹽或 EDTA 檢索的 FFPE 組織。


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